Il corso si propone di fornire le conoscenze teorico-pratiche sulle principali tecniche cito-istochimiche per l'identificazione in situ dei principali costituenti biomolecolari della cellula, sia in cellule in coltura sia in tessuti.

The aim of the cytochemistry and histochemistry course is to provide the students with the theoretic and practical knowledge about the main cyto-histochemical techniques for the in situ biomolecular components detection, both in cell cultures and in tissues.  

Strumenti di osservazione

-  Microscopio ottico

-  Microscopio elettronico

-  Microscopio a scansione

-  Microscopio a fluorescenza

-  Microscopio confocale

Allestimento del campione per M.O.

-  Prelievo

-  Fissazione

-  Inclusione

-  Taglio

Colorazioni cito/isto-morfologiche

-  Principi generali

-  Colorazioni di uso generale

-  Colorazioni per il tessuto connettivo

-  Colorazioni per il tessuto nervoso

-  Colorazioni per il tessuto emopoietico

Colorazioni cito/istochimiche

-  glucidi

-  proteine e enzimi

-  lipidi

-  acidi nucleici

Istochimica delle lectine

Allestimento dei campione in microscopia elettronica

-  Prelievo

-  Fissazione

-  Inclusione

-  Taglio

-  Colorazione

Allestimento dei campione in microscopia elettronica a scansione

Colorazioni cito/istochimiche in Microscopia elettronica

Microscopia a fluorescenza

-  Fluorocromi e coloranti fluorescenti

-  istochimica in fluorescenza (tecniche per l'evidenziazione dell'apoptosi, coloranti per il citoscheletro, coloranti mitocondriali)

Immunocitochimica/Immunoistochimica

-  principi generali

-  tecniche di base, metodo diretto ed indiretto, metodi a tre step

-          colorazioni multiple e tecniche di amplificazione del segnale

-  Immunoperossidasi

-  Immunofluorescenza.

Immunocitochimica/Immunoistochimica in Microscopia elettronica

-  principi generali

-          pre-embedding and post-embedding

-  tecniche di base, metodo diretto ed indiretto, metodi a tre step

-          colorazioni multiple e tecniche di amplificazione del segnale

Immunocitochimica in Microscopia a scansione

Tecniche istoautoradiografiche

Ibridazione in situ

Analysis Instruments

-  Light microscope

-  Transmission electron microscope

-  Scanning electron microscope

-  Fluorescence microscope

-  Confocal microscope

Specimen preparation for light microscopy:

-  fixation

-  dehydration

-  paraffin-embedding

-  sectioning

Cytological and histological morphological stainings

-  general physical considerations

-  common stainings

-  staining methods for connective tissue

-  staining method for nervous tissue

-  staining blood and other cell suspensions

Cytochemical and histochemical stainings

-  methods for carbohydrates

-  methods for proteins and enzymes

-  methods for lipids

-  methods for nucleic acids

Histochemistry with lectins

Specimen preparation for transmission electron microscopy

-  fixation,

-  dehydration and epoxy resin-embedding

-  sectioning

-  staining

Specimen preparation for scanning electron microscopy

Cytochemical and histochemical stainings in electron microscopy

Fluorescence microscopy

-  Fluorochromes and fluorescent probes

-  Histochemical stainings in fluorescence microscopy: apoptosis detection techniques, cytoskeletal dyes, mitochondrial dyes.

Immunocytochemistry/immunohistochemistry in light microscopy

-  Methods and approaches

-  Direct, indirect method and three layer methods

-  multiple stainings and amplification detection methods

-  Enzymatic detection

-  Fluorescence detection

Immunocytochemistry/immunohistochemistry in electron microscopy

-  Methods and approaches

-  Pre-embedding and post-embedding

-  Direct, indirect method and three layer methods

-  multiple stainings and amplification detection methods

Immunocytochemistry/immunohistochemistry in scanning electron microscopy

Autoradiography techniques

In situ hybridization

Esercitazioni pratiche relative agli argomenti del corso

practical training about the course topics

Modalità didattiche

lezioni frontali ed esercitazioni di laboratorio

frontal lessons and laboratory

Testi di studio

Materiale didattico verrà fornito a lezione

Pearse A.G.E.: "Istochimica teoria e pratica". Piccin, Padova, 1978.

Pearse A.G.E.: "Istochimica teoria e pratica". Piccin, Padova, 1989.

Pearse A.G.E.: "Trattato di Istochimica". Piccin, Padova, 1990.

Liquori G.E., Mastrodonato M., Ferri D.: Tecniche istochimiche ed ultrastrutturali. Casa Editrice Waveng, 2010.

Oppure

Kiernan J.A.: Histological and Histochemical methods, Scion Publishing Ltd, 2008

Liquori G.E., Mastrodonato M., Ferri D.: Tecniche istochimiche ed ultrastrutturali. Casa Editrice Waveng, 2010.

Teaching material will be provided during the course.

Pearse A.G.E.: "Istochimica teoria e pratica". Piccin, Padova, 1978.

Pearse A.G.E.: "Istochimica teoria e pratica". Piccin, Padova, 1989.

Pearse A.G.E.: "Trattato di Istochimica". Piccin, Padova, 1990.

Liquori G.E., Mastrodonato M., Ferri D.: Tecniche istochimiche ed ultrastrutturali. Casa Editrice Waveng, 2010.

or

Kiernan J.A.: Histological and Histochemical methods, Scion Publishing Ltd, 2008

Liquori G.E., Mastrodonato M., Ferri D.: Tecniche istochimiche ed ultrastrutturali. Casa Editrice Waveng, 2010.

Modalità di
accertamento

esame orale

oral examination

Disabilità e DSA

Le studentesse e gli studenti che hanno registrato la certificazione di disabilità o la certificazione di DSA presso l'Ufficio Inclusione e diritto allo studio, possono chiedere di utilizzare le mappe concettuali (per parole chiave) durante la prova di esame.

A tal fine, è necessario inviare le mappe, due settimane prima dell’appello di esame, alla o al docente del corso, che ne verificherà la coerenza con le indicazioni delle linee guida di ateneo e potrà chiederne la modifica.

Modalità didattiche

studio dei testi di riferimento

textbook study

Testi di studio

Pearse A.G.E.: "Istochimica teoria e pratica". Piccin, Padova, 1978.

Pearse A.G.E.: "Istochimica teoria e pratica". Piccin, Padova, 1989.

Pearse A.G.E.: "Trattato di Istochimica". Piccin, Padova, 1990.

Liquori G.E., Mastrodonato M., Ferri D.: Tecniche istochimiche ed ultrastrutturali. Casa Editrice Waveng, 2010.

Oppure

Kiernan J.A.: Histological and Histochemical methods, Scion Publishing Ltd, 2008

Liquori G.E., Mastrodonato M., Ferri D.: Tecniche istochimiche ed ultrastrutturali. Casa Editrice Waveng, 2010.

Modalità di
accertamento

Esame orale

Oral examination

Disabilità e DSA

Le studentesse e gli studenti che hanno registrato la certificazione di disabilità o la certificazione di DSA presso l'Ufficio Inclusione e diritto allo studio, possono chiedere di utilizzare le mappe concettuali (per parole chiave) durante la prova di esame.

A tal fine, è necessario inviare le mappe, due settimane prima dell’appello di esame, alla o al docente del corso, che ne verificherà la coerenza con le indicazioni delle linee guida di ateneo e potrà chiederne la modifica.