Il corso si propone di fornire agli studenti nozioni sull'utilizzo della tecnologia del DNA ricombinante per la produzione di agenti terapeutici, diagnostici, prodotti commerciali e per la ricerca di base, in organismi procarioti ed eucarioti.

1. Tecnologia del DNA ricombinante
1.1 endonucleasi di restrizione.
1.2 vettori di clonazione (plasmidi, cosmidi, fagi).
1.3 trasformazione e transfezione.

2. I sistemi biologici della biotecnologia molecolare
2.1 E. coli e S. cerevisiae.
2.2 cellule di insetto.
2.3 colture cellulari animali.

3. Manipolazione dell'espressione genica nei procarioti
3.1 promotori forti e regolabili.
3.2 proteine di fusione.
3.3 vettori di espressione.

4. Produzione di proteine ricombinanti in cellule eucariote
4.1 sistemi di espressione basati sul lievito
4.2 sistemi di espressione basati su cellule di insetto.
4.3 sistemi di espressione per cellule di mammifero.

5. Sintesi chimica del DNA
5.1 metodo della fosforammidite
5.2 utilizzo degli oligonucleotidi sintetici.

6. Mutagenesi
6.1 mutagenesi random e sito-specifica (tramite oligonucleotidi e tramite PCR).
6.2 manipolazione di proteine.

7. Diagnostica molecolare
7.1 sistemi diagnostici di tipo immunologico.
7.2 sistemi diagnostici basati sul DNA.
7.3 Diagnosi delle malattie genetiche.

8. Produzione di agenti terapeutici ricombinanti
8.1 prodotti farmaceutici.
8.2 anticorpi.
8.3 enzimi.

9. Vaccini
9.1 vaccini subunità.
9.2 vaccini attenuati.
9.3 immunizzazione genetica.
9.4 vaccinia virus.

10. Sintesi di prodotti commerciali tramite utilizzo di microrganismi ricombinanti
10.1 antibiotici
10.2 biopolimeri.
10.3 piccole molecole di importanza industriale.

11. Esercitazioni di laboratorio

Modalità didattiche

Lezione frontale (7 CFU); laboratorio (1 CFU)

Obblighi

Obbligo di frequenza delle attività di laboratorio, per almeno 2/3 della loro durata

Testi di studio

GLICK Bernard R , PASTERNAK Jack J. BIOTECNOLOGIA MOLECOLARE-Principi e applicazioni del DNA ricombinante (Zanichelli, 1999)
Brown, T.A. BIOTECNOLOGIE MOLECOLARI, principi e tecniche (Zanichelli, 2007)
Primrose S, Twyman R, Old B. INGEGNERIA GENETICA, principi e tecniche (Zanichelli, 2004)
J. D. Watson, A.A. Caudy, R.M. Myers, J.A. Witkowski. DNA RICOMBINANTE (Zanichelli, 2009)

Modalità di
accertamento

Esame orale

Disabilità e DSA

Le studentesse e gli studenti che hanno registrato la certificazione di disabilità o la certificazione di DSA presso l'Ufficio Inclusione e diritto allo studio, possono chiedere di utilizzare le mappe concettuali (per parole chiave) durante la prova di esame.

A tal fine, è necessario inviare le mappe, due settimane prima dell’appello di esame, alla o al docente del corso, che ne verificherà la coerenza con le indicazioni delle linee guida di ateneo e potrà chiederne la modifica.

Obblighi

Obbligo di frequenza delle attività di laboratorio, per almeno 2/3 della loro durata.
Alternativamente, certificazione attestante attività di laboratorio (riguardante le biotecnologie molecolari) svolta presso altri enti.

Testi di studio

GLICK Bernard R , PASTERNAK Jack J. BIOTECNOLOGIA MOLECOLARE-Principi e applicazioni del DNA ricombinante (Zanichelli, 1999)
Brown, T.A. BIOTECNOLOGIE MOLECOLARI, principi e tecniche (Zanichelli, 2007)
Primrose S, Twyman R, Old B. INGEGNERIA GENETICA, principi e tecniche (Zanichelli, 2004)
J. D. Watson, A.A. Caudy, R.M. Myers, J.A. Witkowski. DNA RICOMBINANTE (Zanichelli, 2009)

Modalità di
accertamento

Esame orale

Disabilità e DSA

Le studentesse e gli studenti che hanno registrato la certificazione di disabilità o la certificazione di DSA presso l'Ufficio Inclusione e diritto allo studio, possono chiedere di utilizzare le mappe concettuali (per parole chiave) durante la prova di esame.

A tal fine, è necessario inviare le mappe, due settimane prima dell’appello di esame, alla o al docente del corso, che ne verificherà la coerenza con le indicazioni delle linee guida di ateneo e potrà chiederne la modifica.