Obiettivi Formativi
Il percorso didattico del biennio prevede una serie di materie biologiche atte ad ottenere un concreto inquadramento delle tecniche e metodologie applicate alla diagnostica morfologica dei diversi apparati dell’organismo umano. In tal senso, dopo un primo inquadramento delle metodologie di evidenziazione del campione nell’insegnamento di “Citochimica e Istichimica” questo modulo affronta tematiche riguardanti le strumentazioni del settore delle Microscopie e delle metodologie ad esse correlate per lo studio dei fenomenti cellulari che riguardano il funzionamento delle cellule dell’organismo umano ( citologia-citopatologia clinica), del loro differenziamento e della conseguente costituzione nei diversi tessuti (Istologia-Istopatologia clinica).
Programma
I MODULO
La Microscopia Ottica: prelievo e fissazione del tessuto, inclusione in paraffina; taglio delle sezioni e colorazione; il microscopio ottico.
La Microscopia Elettronica:prelievo e fissazione del campione; inclusione in resina; taglio delle sezioni e colorazione; il microscopio elettronico.
Tecniche di immunocitochimica: antigeni e anticorpi; aspecificit?; metodo indiretto, diretto e metodi di amplificazione; colorazioni multiple; immunofluorescenza; marcatori in microscopia elettronica: pre-embedding e postembedding.
Microscopia elettronica a scansione: prelievo, fissazione e disidratazione del campione; montaggio su supporto dei campioni e metallizzazione; microscopio elettronico a scansione.
II? MODULO
I fondamenti della citometria a flusso: Diffusione, assorbimento della luce e fluorescenza, fluorocromi. Struttura del cimometro a flusso, cell sorting.
Applicazioni in cinetica cellulare: Misure di DNA, cinetica cellulare, marcatori di proliferazione, analisi degli istogrammi, analisi biparametrica DNA/BrdU
Applicazioni in Immunofluorescenza: immunofluorescenza quantitativa, metodi in immunologia cellulare, analisi delle distribuzioni (cluster).
Applicazioni in biologia cellulare: studio delle funzioni cellulari, studio delle cellule germinali, analisi della ploidia, studio e sortine di cromosomi umani.
Strumentazioni citometriche: FACScalibur, Coulter XL, CYan, PAS IV.